關(guān)于干細(xì)胞移植,神經(jīng)科學(xué)家進(jìn)行了大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床前實(shí)驗(yàn),希望移植細(xì)胞能起到細(xì)胞替代治療的效果。
1、移植途徑
(1)靜脈或動(dòng)脈注射一定濃度的干細(xì)胞懸液。
(2)通過(guò)腦立體定位儀,將干細(xì)胞懸液注射到損傷腦實(shí)質(zhì)或損傷同側(cè)側(cè)腦室。體內(nèi)給予,其操作更簡(jiǎn)單,且更符合臨床應(yīng)用。將干細(xì)胞注射到腦梗塞區(qū),不利于干細(xì)胞的存活。相比靜脈給予,動(dòng)脈給予方式似乎更好,減少了干細(xì)胞在體內(nèi)循環(huán)的路徑。
(3)干細(xì)胞懸液滴到鼻腔黏膜。此種方法無(wú)創(chuàng)傷,在臨床易進(jìn)行。但目前尚不知干細(xì)胞滲透到損傷腦組織的效率怎樣。
(4)腦中風(fēng)時(shí),腰椎穿刺給予神經(jīng)干細(xì)胞,移植的神經(jīng)干細(xì)胞遷移到側(cè)腦室,并進(jìn)入鄰近的腦實(shí)質(zhì),分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。
2、移植時(shí)間
大多數(shù)干細(xì)胞移植的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),是在腦損傷后1~2天進(jìn)行。也有報(bào)道顯示,局灶性腦缺血后l周進(jìn)行細(xì)胞移植,顯示出神經(jīng)保護(hù)作用。
3、免疫排斥
神經(jīng)干細(xì)胞具有低免疫原性,不表達(dá)成熟抗原如MHCⅠ和Ⅱ類分子,因此同種異體移植后,免疫排斥輕或無(wú)
免疫排斥反應(yīng)。而骨髓基質(zhì)干細(xì)胞可能引起強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)導(dǎo)致快速急性排斥。因此,一些移植實(shí)驗(yàn)使用了免疫抑制劑,但是必須重視免疫抑制劑的嚴(yán)重副作用,如抑制免疫細(xì)胞進(jìn)入缺血損傷區(qū)。
4、移植細(xì)胞的證實(shí)
移植前用一些標(biāo)志物標(biāo)記細(xì)胞,可以在體內(nèi)顯示移植細(xì)胞。標(biāo)志物包括穩(wěn)定的轉(zhuǎn)基因標(biāo)志物如綠色熒光蛋白、細(xì)胞質(zhì)的β-半乳糖苷酶基因、不擴(kuò)散的細(xì)胞核標(biāo)志物BrdU。種族特異性的標(biāo)志物、用Y或X染色體染色也可顯示移植細(xì)胞。但是,部分移植細(xì)胞進(jìn)入體內(nèi)后死亡,胸腺嘧啶類似物可能從死亡細(xì)胞釋放出來(lái),被正在分裂的宿主細(xì)胞攝取,因此內(nèi)源性的神經(jīng)干細(xì)胞及其子細(xì)胞可能成為BrdU陽(yáng)性細(xì)胞,不能與移植細(xì)胞相區(qū)別。故BrdU不是標(biāo)記移植細(xì)胞理想的示蹤物。